GMP培训教材-污染及交叉污染，污染源的产生及控制

1微生物污染

1.1定义：

微生物（Microorganisms  microbes）是指一类体积微小，结构简单，大多是单细胞的，必须用光学显微镜观察形态的微小生物的通称。

1.2微生物的特征：

个体小，作用大；分布广，种类多；繁殖快，代谢强；易变异。

1.3微生物的主要种类：

非细胞型：病毒（病毒、类病毒、脘病毒）；原核细胞型：细菌、衣原体、立克次体、支原体、螺旋体和放线菌；真核细胞型：真菌（酵母菌、霉菌）、原生动物、显微藻。

2微生物与人类

（1）人类真正开始认识微生物是发明了显微镜之后。至少放大1000倍才能看到。

（2）病菌只占全部细菌的一小部分。在人类已知的1400种细菌中，只有150种对人、植物、饲养动物造成危害。

（3）自然界不可缺少微生物：生物链的一环、食品发酵 、化学医药工业

3微生物在自然界分布

土壤：最适宜生长的环境；水：90%为革兰氏阴性菌，病原微生物易通过水传播；空气：主要依附于灰尘。人及动物的呼吸道排出，特别易造成病毒传播。

4细菌

细菌是一类细胞细而短（细胞直径约0.5μm,0.5-5μm）、结构简单、细胞壁坚韧以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生物，分布广泛。

（1）细菌的形态：球菌（包括双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌）、杆菌、螺旋菌。

（2）细菌的基本结构：细胞壁、 胞浆膜、间体、细胞浆、核糖体、核质。某些细菌具有荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞，为其特殊结构。芽胞是细菌的休眠体，能够抵抗恶劣环境因素。因不同细菌芽胞的形态不同，因此可作为鉴别的依据。

（3）细菌的繁殖：二分分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。

（4）细菌的菌落：以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的细菌子细胞集团。细菌的菌落特征因种而异。可作为鉴定细菌种的依据。

5真菌

真菌比细菌大几倍至几十倍。结构比细菌复杂。

真菌可分单细胞和多细胞两类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，称酵母菌(yeast)。多细胞真菌大多长出菌丝和孢子，交织成团，称丝状菌(filamentous fungus)，又称霉菌(mold)

（3）真菌感染的防治原则：皮肤癣菌的传播主要靠孢子。遇潮湿和温暧环境又能发芽繁殖。当体表角质层破损或糜烂，更易引起感染。

6病毒

病毒（virus）是最微小，结构最简单的微生物。必须用电子显微镜放大几万至几十万倍后方可观察。无完整的细胞结构，仅有一种核酸（RNA或DNA）作为其遗传物质。病毒体大小的测量单位为纳米（nanometer ,nm），最小约为30nm，如脊髓灰质炎病毒、鼻病毒等。

在微生物引起的疾病中，由病毒引起的约占75％。不仅传染性强、流行广泛，而且很少有特效药物。

病毒必须在活细胞中方能进行生命活动。

7微生物的营养要求

微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等。根据微生物对碳源的要求不同，可将其分为自养菌和异养菌两大营养类型。

凡能利用无机碳合成菌体内有机碳化物的，叫自养菌；不能利用无机碳而需要有机碳才能合成菌体内有机碳化物的，为异养菌。 

8常见的影响微生物生长与死亡的物理、化学因素主要有：

（1）温度：温度是影响有机体生长与存活的最重要的因素之一。

微生物生长的温度范围较广，已知的微生物在零下12-100℃均可生长。而每一种微生物只能在一定的温度范围内生长。各种微生物都有其生长繁殖的最低温度、最适温度、最高温度和致死温度。

（2）氢离子浓度(pH)：每种微生物都有其最适pH值和一定的pH范围。强酸和强碱具有杀菌力。

（3）氧化还原

（4）辐射：辐射是指通过空气或外层空间以波动方式从一个地方传播或传递到另一个地方的能源。它们或是离子或是是电磁波。电磁辐射包括可见光、红外线、紫外线、X射线和Υ射线等。

（5）干燥：水分是微生物的正常生命活动必不可少的。干燥会导致细胞失水而造成代谢停止以至死亡。

（6）渗透压：细胞若置于高渗溶液中，造成细胞脱水而不能生长甚至死亡。所以日常生活中常用高浓度的盐或糖保存食物，如腌渍蔬菜、肉类及蜜饯等。

（7）超声波：超声波具有强烈的生物学作用，超声波的作用是使细胞破裂。

（8）重金属及其化合物：大多数重金属及其化合物都是有效的杀菌剂或防腐剂。其作用最强的是Hg、Ag和Cu。如：二氯化汞又名升汞，是杀菌力极强的消毒剂。0.1-1%浓度的硝酸银常用于皮肤的消毒。

（9）有机化合物：如酚、醇、醛等能使蛋白质变性，是常用的杀菌剂。

（10）卤族元素及其化合物：碘：是强杀菌剂。3-7%碘溶于70-83%的乙醇中配制成碘酊，是皮肤及小伤口有效的消毒剂。碘一般都作外用药。氯气或氯化物：这是一类最广泛应用的消毒剂。

（11）表面活性剂：具有降低表面张力效应的物质称为表面活性剂，可影响微生物细胞的生长与分裂。如肥皂、漂白粉、洗衣粉等。

（12）染料：特别是碱性染料，在低浓度下可抑制细菌生长。

（13）化学疗剂：能直接干扰病原微生物的生长繁殖并可用于治疗感染性疾病的化学药物即为化学疗剂。

9微生物污染所引起的药品质量变化

（1）药品物理性状的改变。

（2）药品化学成分变化：微生物几乎具有降解所有有机物的能力。微生物产酸：可导致液体制剂的PH值降低。微生物产气：致使药品化学成分改变，并可引起安瓿、玻璃瓶爆炸。

（3）药品疗效的变化：某些微生物有较强的降解力，因此许多药可被降解而失效或显著地改变疗效。

10传播污染的四大媒介——空气、水、表面和人体

10.1空气：微生物常常依附于尘埃微粒的表面而悬浮在空气中。

药品生产洁净室（区）的空气洁净度要求
洁净度级别        尘粒最大允许数/立方米        微生物最大允许数
                    ≥0.5μm      ≥5μm       浮游菌/立方米      沉降菌/皿
    100级         3500        0                5             　 1

            10000级       350000     2000              100               3

            100000级      3500000    20000              500             10

            300000级      10500000    60000            -----            15

10.2洁净厂房的空气净化

（1）空气净化的目的：就是控制住尘埃微粒、微生物和有毒有气体，同时保持空气中含有必要的新鲜空气量。

（2）洁净室的主要功能：A、阻止灰尘的产生。B、阻止灰尘的进入。C、把已有的灰尘一次有效地排出去。

10.3洁净室的发尘源：空气、人体、内环境发尘、设备发尘、尘埃积存。

（1）空气——空气中的尘埃粒子是含有微生物的。因此，空气是侵袭我们产品的污染物的主要媒介。
（2） 人体的发尘——洁净室操作人员是最主要的发尘源。

人体所散发粒子数（≥0．３um）

着衣种类       　　　　　　测定日期        细菌数/100cm
上衣       内侧外侧        使用5日后        300200
裤子       内侧外侧        使用5日后        45070
★帽子     内侧外侧        使用5日后        100150
★口罩     内侧外侧        使用1日后        2.2×104100
袜子        内侧外侧        使用1日后        3×1042，800
（3）内环境的发尘——洁净厂房内装饰的发尘量，大部分来自地面（操作人员移动时与地面摩擦引起）。
（4） 设备的发尘——设备运转产尘。
（5） 尘埃的积存——净化空气流分布不均匀引起。

10.4空气过滤器：按过滤微粒的大小分为初效、中效、亚高效、高效、超高效。  

10.5、空气净化系统（HVAC）评价七大指标：1、温湿度；2、静压差；3、风量[送风量（换气次数）新风量]；4、尘埃粒子数；5、微生物；6、噪声；7、照度。

11水——微生物在绝对的“纯水”中是不能生长的

（1）在生产过程中所用的水：原水（地下水、地面水、城市管网水）→适当处理后→生产用水

（2）工艺用水按洁净程度分为饮用水、纯化水、注射用水。

12表面

（1）一个表面看起来很干净，而实际上已被千百万个微生物所污染，除非已经做了正确的消毒灭菌。

（2）清洗表面的基本知识

A应使清洁剂与污染物紧密接触；

B从被清洗的表面上移去污染物；

C将污染物扩散到溶剂中；

D防止已扩散的污染物重新沉积回到清洁的表面上。

13人——生产区最大的污染源

⑴人的头发和皮肤。⑵水滴——如呼吸、咳嗽和喷嚏。⑶衣着。⑷化妆品和手饰。⑸人为差错引起。

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